Duilio Del Prete nasce a Cuneo (Italia) nel 1938.
Viene ricordato per la sua partecipazione a numerosi film della cosiddetta commedia all'italiana, fra cui Amici miei, di Mario Monicelli, e Alfredo, Alfredo, di Pietro Germi.
Come attore ha avuto anche a metà degli anni settanta una breve esperienza negli Stati Uniti, lavorando in due film con il regista Peter Bogdanovich.
Nel 1997 ha inoltre lavorato con Riccardo Milani per la realizzazione del film Auguri professore dove ha interpretato la parte del preside.
Oltre al ruolo di interprete Duilio Del Prete ha lavorato come musicista nel film drammatico di Giorgio Bontempi Summit (1968). È stato poi autore di canzoni popolari e di protesta. Come cantante, in particolare, ha inciso un album - Duilio Del Prete canta Brel - contenente cover di Jacques Brel. Altre sue produzioni discografiche sono state Dove correte!, del 1968, e La Bassa Landa, del 1977.
Duilio Del Prete ci lascia all'età di 60 anni spegnendosi il 2 Febbraio 1998 a Roma.